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聚合酶連式反應
發布時間：11月06日　瀏覽：4875   [ 大 中 小 ]　視力保護色：
聚合酶鏈式反應(polymerase chain reation PCR) 又稱為無細胞克隆系統或特異性DNA 序列體外引物定向酶促擴增法，是基因擴增技術的一次重大革新。PCR 是利用單鏈募核苷酸引物對特異DNA 片段進行體外快速擴增的一種方法。該反應是一個指數式反應，可在短時間內使極微量的目的DNA 片段特異地擴增上百萬倍。
RCR操作體系中含有:
　　(1)模板:其中包含有目的基因片段，PCR反應的模板是待檢測核酸(DNA或RNA)分子，雙鏈DNA可直接用于反 應，而RNA則需要用反轉錄酶反轉錄成為cDNA,然后用作聚合酶反應的模板。
　　(2)DNA聚合酶:最初的聚合酶鏈反應是用DNA聚合酶I的Klenow片段或T4DNA聚合酶催化的。但是由于每輪反應都需要三個溫度點，最初的PCR需要在每輪反應中加人DNA聚合酶。以后應用耐熱TaqDNA聚合酶后，一次加酶反應到底的問題才得以完滿的解決。
　　(3)一對引物:這是兩個人們根據已知DNA序列的、由人工合成的、與所要擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段，即左右端引|物。
　　(4)四種三磷酸脫氧核苷(即dNTP):這是合成DNA所需要的原料。
　　(5)適當的緩沖液體系。
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